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        emfret

        更新時間:2016-12-07點擊次數:271

        關鍵詞:emfret
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        常用生化試劑作用:   
        1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質,特別是與DNA結合的組蛋白,在尿素和SDS中穩定。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
        2、SDS:十二烷基酸鈉,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質結合而沉淀。
        3、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結構相似,所以它和乳糖一樣,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結合,使阻遏蛋白的空間構像變化,四聚體解聚成單體,失去與操縱子特異性結合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,使其后的基因得以轉錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選。作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定。
        4、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,在IPTG的催化下顯藍色。常跟IPTG用與藍白斑篩選。
        5、G418:一種抗生素,對幾乎所有的細胞都有毒性,是穩定轉染常用的選擇試劑。
        6、DMSO:二甲基亞砜。實驗室用于作液體層析溶劑,同用作測試物質紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴。
        7、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細胞裂解液成分之一,在保護蛋白活性方面有一定作用, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40。
        8、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,對核膜破壞的作用弱,結合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
        9、BSA:牛血清白蛋白,主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內參和抗體稀釋液。
        10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩定劑,也用于穩定毛細管電泳中的變性單股DNA。 

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