2012-1128
1、免疫脾細(xì)胞的制備制備單克隆抗體的動(dòng)物多采用純系Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。一般血清的制備，也可采用脾內(nèi)直接免疫法。2、骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選在融合前，骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過含8-AG的培養(yǎng)基篩選，防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性（恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活）。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，融合前24h換液一次，使骨髓瘤細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期。3、細(xì)胞融合的關(guān)鍵:①技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。②融合試...
查看更多2012-1123
抗體monoclonalantibody；McAb1、定義1：能與相應(yīng)抗原（表位）特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。所屬學(xué)科：免疫學(xué)（一級(jí)學(xué)科）；免疫系統(tǒng)（二級(jí)學(xué)科）；免疫分子（三級(jí)學(xué)科）2、定義2：在人和動(dòng)物體內(nèi)，由于抗原或半抗原入侵刺激機(jī)體而在細(xì)胞中產(chǎn)生的免疫球蛋白。能可逆、非共價(jià)、特異地與相應(yīng)抗原結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合體。所屬學(xué)科：生物化學(xué)與分子生物學(xué)（一級(jí)學(xué)科）；總論（二級(jí)學(xué)科）3、定義3：機(jī)體內(nèi)B細(xì)胞在抗原刺激下產(chǎn)生的具有特異性功能的球蛋白。所屬學(xué)科：水產(chǎn)學(xué)（一級(jí)...
查看更多2012-1121
一、優(yōu)點(diǎn)1、直接觀察活細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)。用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)和腫瘤學(xué)等多種學(xué)科研究。2、直接觀察細(xì)胞的變化可便于攝影。3、研究細(xì)胞種類如低等到高等到人類、胚胎到成體、正常組織到腫瘤。4、便于使用各種技術(shù)：相差、熒光、電鏡、組化、同位素標(biāo)記等方法觀察和研究細(xì)胞狀況。5、是分子生物學(xué)和基因工程學(xué)的研究對(duì)象，也是其主要的組成部分。6、易于施用物理、化學(xué)生物的實(shí)驗(yàn)研究。7、易于提供大量生物性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,耗資少比較經(jīng)濟(jì)。8、成為生物制品單克隆抗體生產(chǎn)和基因...
查看更多2012-1114
1、紫外消毒過程中會(huì)產(chǎn)生臭氧分子，對(duì)人體有害。一般情況下，消毒后至少半小時(shí)后再進(jìn)入。2、所有的實(shí)驗(yàn)器材都要經(jīng)過消毒處理；所有的細(xì)胞操作都在安全柜中進(jìn)行，每一步都要注意不能用手碰到瓶口，培養(yǎng)液不能碰到瓶口，拿培養(yǎng)瓶時(shí)要使培養(yǎng)瓶的瓶口微微翹起。3、細(xì)胞消化時(shí)間不能太長，要讓細(xì)胞盡快脫離不舒服的環(huán)境；離心時(shí)離心機(jī)轉(zhuǎn)速不能太高，實(shí)驗(yàn)前要設(shè)定好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間；重懸細(xì)胞時(shí)要保證細(xì)胞*混勻，在顯微鏡下觀察細(xì)胞是一個(gè)一個(gè)的。4、傳代培養(yǎng)時(shí)要注意無菌操作并防止細(xì)胞之間的交叉污染。所有操作要盡量...
查看更多2012-117
1、化凍將血清（FetalBovineSerum，Hyclone）從－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化凍過夜；也可室溫（或浸于自來水中）化凍，化凍后若不馬上滅活，可以放入4℃冰箱暫時(shí)保存；2、滅活①放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱（同時(shí)放入一個(gè)內(nèi)裝200ml自來水的血清瓶，插入一根溫度計(jì)，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）；②當(dāng)溫度計(jì)顯示56℃時(shí)，控制在此溫度30分鐘±3分鐘；若不小心使溫度上升超過56℃，則：若仍未超過60℃，且時(shí)間很短（比如：不超過5分鐘），則仍可使用；若超過60℃...
查看更多2012-112
1、凍存條件：建議采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+該細(xì)胞株無血清培養(yǎng)基2、凍存方法：①梯度凍存：4℃——1h；-20℃——30min；-80℃——過夜②使用凍存盒：直接放入-80℃冰箱中過夜（有些細(xì)胞不適應(yīng)此種方法）3、復(fù)蘇方法：①打開水浴，將培養(yǎng)基放入水浴中，待其穩(wěn)定至37℃；②細(xì)胞從液氮內(nèi)取出后，應(yīng)快速將細(xì)胞放于37℃水浴中，輕輕振搖，使其溶化，（盡量避免溶化前凍存管脫離水浴）；③將溶化后將細(xì)胞凍存懸液離心，轉(zhuǎn)速1000rpm，3min,后棄去上清，使細(xì)胞重...
查看更多2012-1026
細(xì)胞生長要求嚴(yán)格的無毒無污染環(huán)境，因此必須注意培養(yǎng)室的清潔衛(wèi)生，保持操作空間的無菌條件。1、培養(yǎng)室應(yīng)為獨(dú)立、封閉的空間。培養(yǎng)室及緩沖間都應(yīng)保持整潔，不要隨意出入；2、保持超凈工作臺(tái)的無菌環(huán)境，每次使用前打開紫外燈照射消毒15—30分鐘；每次使用后將廢棄物清理干凈，各用具規(guī)放整齊，用70%酒精擦凈臺(tái)面，再打開紫外燈照射30分鐘以上；3、定期擦洗桌面、地板、清潔培養(yǎng)室，并用0.1%的新潔爾滅溶液消毒；定期打開培養(yǎng)室的大紫外燈，將整個(gè)房間進(jìn)行照射消毒；4、每次打開培養(yǎng)箱前，或手伸入...
查看更多2012-1024
一、康寧Corning1、標(biāo)準(zhǔn)TC處理：培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿為大氣下等離子體處理，滾瓶和培養(yǎng)管為真空等離子體處理，處理的表面帶負(fù)電，增加氧原子含量。2、CellBIND處理：是指微波等離子處理，處理效果更好，更親水。二、BD1、BDFalcon處理：為真空等離子處理。2、BDPrimaria處理：為真空等離子體加入氧氣和氨氣混合氣體處理，使表面有含氧和含氮基團(tuán)。三、Nunc：表面處理專家1、PolySorp：對(duì)疏水性分子具有高親和力。2、MediSorp：化學(xué)性介于Poly...
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