血清的滅活與分裝

一、化凍將血清（FetalBovineSerum，Hyclone）從－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化凍過夜；也可室溫（或浸于自來水中）化凍，化凍后若不馬上滅活，可以放入4℃冰箱暫時保存；二、滅活1、放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱（同時放入一個內(nèi)裝200ml自來水的血清瓶，插入一根溫度計(jì)，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）；2、當(dāng)溫度計(jì)顯示56℃時，控制在此溫度30分鐘±3分鐘；若不小心使溫度上升超過56℃，則：若仍未超過60℃，且時間很短（比如：不超過5分鐘），則仍可使用；若超過6...

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ES細(xì)胞的凍存操作

1、常規(guī)方法將細(xì)胞消化成單細(xì)胞懸液；2、轉(zhuǎn)入試管，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘；3、配適量凍存液（為含10%二甲亞砜（DMSO），10%FBS的DMEM培養(yǎng)液）；4、棄上清，每管加入1ml凍存液，吹打成細(xì)胞懸液（只要使ES細(xì)胞分散成3—5個細(xì)胞的小團(tuán)塊即可），轉(zhuǎn)入凍存管，作好標(biāo)簽；5.放入程序凍存盒內(nèi)24小時后轉(zhuǎn)入液氮罐中凍存。相關(guān)產(chǎn)品信息：凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑

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使用液氮應(yīng)注意的事項(xiàng)

1、準(zhǔn)備凍存管、凍存盒放置需液氮中保存的樣品。2、液氮中有三個取液氮容器，不宜直接將凍存管放于液氮罐中，這樣會使凍存管漂浮起來。固可用紗布、棉線將取氮容器口封住，保存樣品。3、取樣品時，需要使用研缽。研缽在使用前，需清洗，并用純酒精灼燒以充分滅菌。在研磨液氮保存的樣品時，需加入液氮，迅速研磨，待組織變軟，再加少量液氮，再研磨。如此三次。可用消毒過的鑰匙將研缽中的組織樣品轉(zhuǎn)入EP管中。介于所取的樣品不能*轉(zhuǎn)移到EP管中，故而在取樣時需多取樣品，以免不夠。4、新買的液氮罐需用一定...

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冰箱存放樣品的幾點(diǎn)建議

一、提高冰箱空間使用率：1、在冰箱中制作必要的支架；2、使用凍存盒，替代各種手套、袋子、板架；3、采用節(jié)省空間的凍存管。二、對于長期儲存的重要樣品：實(shí)驗(yàn)室重要的菌種、組織、蛋白等樣品建議可選擇二維編碼管（2D管）進(jìn)行儲存，避免樣本/信息的丟失、錯用、誤用，同時實(shí)現(xiàn)樣本的有效管理。相關(guān)產(chǎn)品信息：凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑

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樣品復(fù)蘇注意事項(xiàng)

一、樣品復(fù)蘇時的注意事項(xiàng)1、注意做好個人防護(hù)，如護(hù)目鏡、面罩、手套、防護(hù)服，避免炸傷2、盡量使用鑷子3、水浴鍋/燒杯上覆蓋毛巾二、樣品復(fù)蘇時1、對于未經(jīng)保護(hù)的凍存管，切忌快速扔進(jìn)水浴中。2、凍存管從液氮液相取出后必須在液氮?dú)庀嘀袃Υ?4h，這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸，從而降低凍存管中的壓力。3、凍存管從液氮液相取出后快速放置于-20度冰箱30min，再進(jìn)行水浴復(fù)蘇。4、凍存管從液氮取出后，用手輕輕擰松管蓋，使液氮蒸發(fā)后再進(jìn)行水浴復(fù)蘇。5、對于不需水浴復(fù)蘇的樣品...

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凍存操作的注意事項(xiàng)

一、與液氮接觸的樣品需在操作時注意：1、急凍或長期液氮儲存的樣品會接觸到液氮；2、不建議用微量離心管；3、對管口進(jìn)行密封，避免液氮滲透；4、液氮滲入的風(fēng)險(xiǎn)：炸管、樣品間交叉污染；5、轉(zhuǎn)移過程中注意使用冰盒。二、生物安全柜中操作凍存管：1、單手操作，避免污染，解決靜電、管子滑落等問題；2、用力適中，避免扭力過度造成脫絲，影響密封效果。三、注意做好標(biāo)記：1、管蓋和管壁均做標(biāo)記；2、推薦使用冷凍標(biāo)簽紙和低溫記號筆。相關(guān)產(chǎn)品信息：凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,...

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如何保存菌株？

1、使用前用油性白板筆在每個凍存管上標(biāo)記上細(xì)菌的名稱，每支凍存管只可接種。2、在無菌條件下,打開凍存管的螺旋瓶蓋。3、用接種環(huán)挑取新鮮細(xì)菌純培養(yǎng)物（18-24小時）,放入凍存液中。擰緊瓶蓋,來回顛倒使細(xì)菌乳化,配成大約3-4麥?zhǔn)媳葷岫鹊木鷳乙海ㄒ话阋粋€平板的純培養(yǎng)物可保存兩管）。此時細(xì)菌懸液會吸附在小瓷珠內(nèi)外表面，隨后進(jìn)行高壓滅菌消毒處理。4、用無菌移液器將凍存管中的菌懸液盡量吸出。吸出的菌懸液應(yīng)放入消毒液中。5、擰緊瓶蓋.記錄下接種細(xì)菌的詳細(xì)情況。6、將接種完細(xì)菌的凍存管放...

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細(xì)胞的凍存操作

一、用品1、5%胰蛋白酶2、含10%~20%血清培養(yǎng)液3、DMSO或無色新鮮甘油（15磅蒸汽高壓消毒）4、吸管、離心管、凍存管二、操作步驟1、從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但是對數(shù)生長期的細(xì)胞，已將長滿的細(xì)胞凍存后生存率低。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液。2、用胰蛋白酶把單層生長的細(xì)胞消化下來，懸浮生生長的細(xì)胞則不需要處理。依據(jù)傳代方法把消化好的細(xì)胞收集于離心管并計(jì)數(shù)，離心。3、去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液，加入配好的凍存培養(yǎng)液（含10%的DMSO或甘油），...

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